基因扩增PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。
基因扩增PCR的日常维护保养工作:
1、样品池的清洗
先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液体,用棉签吸干剩余液体,设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行,让残余液体挥发去除,一般5~10min即可。
2、热盖的清洗
对于荧光定量基因扩增仪,当有荧光污染出现,而且这一污染并非来自样品池时,或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时,需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面,确保样品池的孔干净,无污物阻挡光路。
3、仪器外表面的清洗
清洗JS-G基因扩增仪的外表面可以除去灰尘和油脂,但达不到消毒的效果,选择没有腐蚀性的清洗剂对基因扩增仪的外表面进行清洗。
4、更换保险丝
先将基因扩增仪关机,拔去插头,打开电源插口旁边的保险盒,换上备用的保险丝,观察是否恢复正常。