对于经常做分子生物学实验的人来说,PCR就如家常便饭,变性—退火—延伸,基本原理和过程一直没变。随着PCR技术的发展,研究人员推出了普通PCR的升级版本来解决PCR实验过程中常常出现的扩增效率低,特异性差等问题,如现在已被我们熟知的温度梯度PCR、降落PCR、巢式PCR等,这里我们先来说说梯度PCR,在进行PCR优化时,研究者都会考虑退火温度的优化,这时就需进行梯度PCR。
梯度PCR是在一台PCR仪上同时进行同一PCR反应时,以引物的理想退火温度Tm-5作为为参考值,设置不同退火温度,这些温度对应PCR仪模块的不同的孔,且呈现梯度递增或递减,更终摸索出针对这台PCR仪和当前外在环境的合适的退火温度。
虽然我们可以通过梯度PCR快速摸索出适合仪器的退火温度,减少繁琐的重复试验,但在实际应用中仍然会遇到恼人的问题。经常会有人困惑同一反应体系在原来的PCR仪上摸索出合适的退火温度,当换到另一台PCR仪(同一型号/不同品牌/不同型号)上进行相同的扩增反应时,或者更换耗材(PCR管等)后扩增效果并没有之前理想。究其原因,主要是由于热传导效率的不同而导致反应管内样品的温度和PCR仪模块差异所造成的。梯度PCR摸索出的条件只有在PCR实验、仪器、试剂和耗材等绝对一致时才是有效的,否则任何一个组成要素的改变都将会带来新的不确定性。显然要彻底解决以上问题,需要一款能够实现高效率的热能传导,并保持模块温度与样品温度高度一致的PCR仪来进行实验。这时我们无需梯度PCR就可以解决模块和样品之间存在的温度差异及差异的不确定性等诸多问题,同时这也大大简化了PCR程序,更加省时、省试剂。
宝予德Life Eco PCR仪不仅具有30℃的更宽限梯度功能,而且拥有出色的控温系统,采用专有的TAS(温度补偿技术),有效避免了加热模块热传导的边缘效应问题,为PCR实验提供一流的稳定性和均一性,确保实验结果的可靠性和重复性。
此外,用户可根据反应体系选择Blook或Tube控温模式,配合选用的试剂和优质的PCR管,实现更佳的扩增条件。